【48812】一种先进的用于高细胞浓度灌流培育的声学截留体系-BioSep

日期：2024-07-28 12:23:14 | 作者: 分级机

  。与批培育和流加补料技能比较，灌流为细胞供给了有利的环境和较短的产品停留时刻。这关于不安稳产品的质量特别的重要。灌流形式的另一个长处是它答应运用较小的生物反应器并削减在位清洗操作

  ·来自生物反应器的细胞悬液被泵输入到设备在生物反应器头板上的声学腔室中。

  ·跟着细胞浓度和灌流速率的添加，声学腔室的功率输入被调整到更高水平，以坚持高别离功率[5]。

  ·运转时刻对应于细胞与清液别离的时刻段。在运转时刻结束时，声场暂时封闭，收成暂停，一起腔室中的细胞回来生物反应器。

  ·在这项研讨中，功率水平缓运转时刻发生了改变，以取得最佳设置，使高密度CHO细胞培育超越125* 106cells/mL。

  ·为了评价在一系列高细胞浓度下的别离功能，将CHO细胞在摇瓶中培育，浓缩、然后悬浮在运用my-Control操作体系的Applikon 250 mL MiniBio生物反应器中。

  ） 试验设备包括：进料罐、废液罐、收成泵、进料泵、声学室、MiniBio 250 mL、my-Control

  对应于收成管路的活细胞浓度，BX对应于生物反应器中的活细胞浓度[4]。为保证安稳和可重复的声学条件，在从收成管路和生物反应器取样之前，超声波功率输入、收成速率和运转

  反冲刷定时器设置至少稳定30分钟。依据所选运转周期的坚持的时刻，在时刻点收集收成样本，以取得共同且可比较的数据

  ·在高细胞密度的灌流培育过程中，需要高循环速率，这会导致声学室内的湍流添加。

  ·在现在的研讨中观察到新的BioSep版别答应声学诱导的细胞聚集体不受搅扰地沉降，最大流入速率高达7 mL/min（~10 L/天），答应保存超越100*106cells/mL的生物反应器浓度。

  ·研讨了1~15L/天的不同净收成率、2~7 W的功率水平缓2至10分钟的运转时刻（未显现值），成果总结在图3中。

  ·从图3中可以精确的看出，当CHO细胞总浓度为100*106cells/mL时，能轻松完成高达3L/天的净收成率，一起坚持98%的典型活细胞别离功率。超越4L/天的净收成率会影响最高密度下的功率，但别离仍保存了90%以上的细胞。

  ·在总浓度为125*106cells/mL时，以2L/天的净收成率运转，细胞别离功率到达98%。

  ·在细胞浓度添加或收成率高的情况下，运用高功率水平缓更短的运转周期是必要的[5]。

  ·优化功率（w）和运转时刻（min）的配对，以完成高密度细胞。这些值的组合使得最高的别离功率是：2 w - 10 min;3 W - 5 min;5 W - 3 min;7 W - 2 min。这些成果是意料之中的，由于更高的功率水平答应在高浓度或高流量条件下添加细胞的保存，而更短的运转时刻避免了细胞聚集体在声室中过度积累，然后才有时机沉降回到生物反应器。

  Figure 3别离功率以黑色方块表明，作为记载的流入管线的净收成率和CHO细胞总浓度的函数。功率水平矩阵表明在该特定净收成率下使用的最大HF功率。黄色虚线L/天之间的鸿沟。

  cells/mL的细胞保存体系，增强了细胞的沉降功率。在该细胞浓度下，以2 L/天的净收成率下运转，别离功率高达98%。

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